Στη 16η ημέρα των επιθέσεων, οι Ηνωμένες Πολιτείες και το Ισραήλ πραγματοποίησαν σφοδρές επιθέσεις κατά της ιρανικής πόλης Ισφαχάν, με τουλάχιστον 15 νεκρούς. Ως απάντηση, το Ιράν εξαπέλυσε πολλαπλές πυραυλικές επιθέσεις κατά του Ισραήλ, ενώ συνεχίζει τις επιχειρήσεις και στις χώρες του Κόλπου. Ο πρόεδρος των ΗΠΑ, Donald Trump, δήλωσε ότι η Τεχεράνη επιθυμεί «μια συμφωνία» και κάλεσε σε ναυτικό συνασπισμό για να παραμείνουν ανοιχτά τα Στενά του Ορμούζ.
Στο Ιράν, κατοικημένες περιοχές στην Σιράζ δέχθηκαν επίθεση, με την ιρανική πρεσβεία να κάνει λόγο για «τρομοκρατική και ανήθικη πράξη». Στην Ισφαχάν, η επίθεση σε βιομηχανική ζώνη προκάλεσε 15 θανάτους και πολλαπλούς τραυματισμούς. Επιπλέον, 20 άτομα συνελήφθησαν στο βορειοδυτικό Ιράν για συνεργασία με το Ισραήλ, παρέχοντας πληροφορίες για στρατιωτικούς και αμυντικούς στόχους.
Το Ισλαμικό Επαναστατικό Σώμα της Φρουράς (IRGC) ανέφερε την «50η κυματοειδή» επιχείρησή του κατά αμερικανικών βάσεων στα Ηνωμένα Αραβικά Εμιράτα, το Μπαχρέιν και το Κουβέιτ. Ο Υπουργός Εξωτερικών του Ιράν, Abbas Araghchi, δήλωσε ότι οι ΗΠΑ χρησιμοποίησαν πυραύλους κρουζ από τα ΗΑΕ, κοντά στο Ντουμπάι, και ότι μια πιθανή ιρανική απάντηση θα ήταν επικίνδυνη για την περιοχή. Σχετικά με τον νέο ανώτατο ηγέτη, Mojtaba Khamenei, ο Araghchi διέψευσε αναφορές περί τραυματισμού του. Το IRGC προειδοποίησε τις ΗΠΑ να απομακρύνουν τις βιομηχανίες τους από τη Μέση Ανατολή.
Σύμφωνα με τον κυβερνήτη της Τεχεράνης, τουλάχιστον 10.000 κατοικίες έχουν υποστεί ζημιές ή καταστράφηκαν ολοσχερώς από τις επιθέσεις ΗΠΑ-Ισραήλ, μετρώντας 1.400 νεκρούς από τις 28 Φεβρουαρίου. Ο Υπουργός Άμυνας των ΗΠΑ, Pete Hegseth, ανέφερε ότι έχουν χτυπηθεί πάνω από 15.000 «εχθρικοί στόχοι». Το Ιράν επιβεβαίωσε τον θάνατο του υποστρατήγου Abdullah Jalali Nasab, καθώς και προηγούμενων ανώτατων στρατιωτικών στελεχών.
Στις χώρες του Κόλπου, η Σαουδική Αραβία ανέφερε την αναχαίτιση τεσσάρων drones κοντά στη Ριάντ, με τουλάχιστον δύο νεκρούς και 12 τραυματίες. Τα Ηνωμένα Αραβικά Εμιράτα κατηγόρησαν το Ιράν για «ηθική χρεοκοπία» μετά από ισχυρισμούς περί ιρανικών επιθέσεων από τα ΗΑΕ. Το Μπαχρέιν ανέφερε θανάτους και τραυματισμούς από ιρανικές επιθέσεις, ενώ το Κουβέιτ ανακοίνωσε τραυματισμούς στρατιωτών από πυραυλικές επιθέσεις και ζημιές στο σύστημα ραντάρ από drones. Το Κατάρ ανέφερε ότι αναχαίτισε όλα τα ιρανικά drones και πυραύλους.
Στις ΗΠΑ, ο Donald Trump δήλωσε ότι το Ιράν επιθυμεί συμφωνία, αλλά οι όροι δεν είναι ακόμη ικανοποιητικοί. Επανέλαβε την πρόθεσή του για συνεργασία με άλλες χώρες για την ασφάλεια των Στενών του Ορμούζ. Αμφισβήτησε την κατάσταση του Mojtaba Khamenei και δήλωσε ότι η επίθεση στην Kharg Island «κατέστρεψε ολοσχερώς» το νησί. Προέτρεψε συμμάχους να στείλουν πολεμικά πλοία για συνοδεία πλοίων στα Στενά, αίτημα που η Ιαπωνία απέρριψε. Η κυβέρνηση Trump απείλησε επίσης ΜΜΕ για αρνητική κάλυψη του πολέμου. Ενώ ο Trump ισχυρίζεται ότι το Ιράν πρότεινε ειρηνευτικό σχέδιο, αναφορές υποδεικνύουν ότι η κυβέρνηση των ΗΠΑ απέρριψε διπλωματικές προσπάθειες για τον τερματισμό του πολέμου. Σύμφωνα με δημοσκόπηση, το 53% των Αμερικανών ψηφοφόρων αντιτίθεται στις επιθέσεις.
Στο Ισραήλ, 108 άτομα νοσηλεύτηκαν λόγω του πολέμου. Σειρήνες ήχησαν σε όλη τη χώρα λόγω ιρανικών πυραύλων και ρουκετών από το Ιράν και τη Χεζμπολάχ, ενώ το Ισραήλ ενημέρωσε τις ΗΠΑ ότι εξαντλούνται οι πύραυλοι αναχαίτισης.
Στον Λίβανο, η Χεζμπολάχ μάχεται κατά του ισραηλινού στρατού, με ισραηλινές επιθέσεις να προκαλούν θανάτους αμάχων, συμπεριλαμβανομένων παιδιών. Από την έναρξη του πολέμου, έχουν σκοτωθεί 826 άτομα και έχουν εκτοπιστεί πάνω από 800.000 στον Λίβανο. Ο Παγκόσμιος Οργανισμός Υγείας ανέφερε 14 θανάτους υγειονομικών στο νότιο Λίβανο.
Στο Ιράκ, η Πρεσβεία των ΗΠΑ στη Βαγδάτη προέτρεψε τους Αμερικανούς πολίτες να φύγουν άμεσα, λόγω απειλών από φιλο-ιρανικές τρομοκρατικές ομάδες. Υπήρξαν επιθέσεις σε ιρακινές φυλακές, ενώ ένα drone χτύπησε διυλιστήριο πετρελαίου κοντά στην Erbil. Στην Ιορδανία, η στρατιωτική δύναμη ανέφερε την αναχαίτιση 79 από 85 πυραύλους και drones που στόχευαν «κρίσιμους στόχους» στο βασίλειο, με 14 τραυματίες.